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[所属栏目: 基因枪]

基 因 枪 操 作 规 程
2011-10-14 15:39 邹金华 

基 因 枪 操 作 规 程

基因枪的操作过程须在无菌条件下进行。

1、基因枪所处的位置及超净工作台用紫外灯灭菌1.5h。

2、70%乙醇对基因枪表面及样品室进行消毒,同时用70%乙醇将阻挡网、固定器浸泡15min,对可裂解膜用70%异丙醇浸一下,不要超过3s,微弹载体用70%乙醇浸一下放在超净工作台上阴干。

3、取微粒载体,用厂家提供的嵌入工具将其固定在钢碗底部环内,取DNA 与金粉混合物,用加样枪吸取一定量加于微载体中央,干燥2min。

4、安装可裂解膜于其托座上,顺时针安到加速器上,用厂家提供的专用扳手适当用力固定。

5、将空间环、阻挡网、阻挡网托座、微粒载片及固定环(带有微粒面朝下)安好,旋紧插入枪体中。

6、被轰击样品,根据参数距离放入轰击室合适位置,关好轰击室门。

7、打开氦气瓶总阀,顺时针调节气压。一般氦压调解标准是高于实验用可裂膜压力200ps(i = 1.379Mpa)。

8、打开基因枪面板左侧真空泵电源开关。

9、将中间气流控制开置于“VAC”位,待真空度达到实验要求时(例如28 英寸汞柱= 94.82Kpa),快速按下此开关到保持位“HOLD”。右侧发射开关只有真空压力达到5英寸汞柱以上方才点亮。向上压住发射键“FIRE”保持不动,直到轰击为止。

10、将中间位置气流控制开关置于 “VENT”位通气,待真空表回零后取出样品。

11、关机。A:把氦气瓶总开关旋紧,打一次空枪,待氦压表(两个表)指针回零后,逆时针旋转氦压表调节阀至最小。B:关闭基因枪电源。

图 片:

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